Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
ОКРАСКА ПРЕПАРАТА ИЗ МОЧИ ПО ЦИЛЬ – НИЛЬСЕНУ
В МОДИФИКАЦИИ ХУЗЕ Техника окраски: 1. Мазок окрашивают карболовым фуксином Циля (основной краситель) при нагревании 3-5 минут или окрашенной фуксином бумагой до появления паров, но, не доводя краситель до кипения. 2. Препарат остудить, снять бумагу, слить краситель и промыть водой. 3. Обесцвечивают 5% раствором серной кислоты (дифференцирующее вещество) в течение 1-2 мин. 3. Остаток кислоты слить, препарат промыть водой и обработать этанолом 20 сек. 4. Докрашивают 3-5 мин водным раствором метиленового синего Леффлера (дополнительный краситель). 5. Препарат промыть водой, подсушить и микроскопировать. Оценка результатов. М. tuberculosis к этанолу устойчивы и не обесцвечиваются, оставаясь красными. М. smagmatis под влиянием спирта эту краску теряют, но при докраске метиленовой синью становятся синими. Приложение 3 ОКРАСИТЬ МАЗОК ИЗ ДРОЖЖЕИ ПО ПЕШКОВУ (выявление оболочки) Техника окраски : 1) Приготовленный мазок фиксируют над пламенем спиртовки. 2) На фиксированный мазок наливают метиленовый синий Леффлера и кипятят над пламенем спиртовой горелки 20 - 30 секунд. 3) Остывший препарат промывают водой и докрашивают 0,5% раствором нейтрального красного в течение 30 – 60 секунд. 4) Опять промывают дистиллированной водой и высушивают на воздухе. 5) Микроскопируют с иммерсией. Оценка результатов . Споры окрашиваются в голубой, либо в синий цвет. Протоплазма вегетативного тела бактерий — розовая или красная. Приложение 4 А) ОКРАСКА НУКЛЕОИДА БАКТЕРИЙ ЯДРОТРОПНЫМ МЕТОДОМ ФЕЛЬГЕНА Техника окраски : 1) Приготовить препарат из бактериальной культуры или дрожжей. 2) Высушить, зафиксировать в жидкости Карнуа 7 мин. 3) Промыть 80 % этанолом. 4) Обработать 1 N НСl, подогретой до 600 С, в течение 7 мин, затем опустить препарат на 1-2 мин в холодную 1N HCl. 5) Обработать фуксинсернистой кислотой (реактив Шиффа) в течение 3-4 часов. 6) Промыть водой, высушить, микроскопировать с иммерсией. Оценка результата. Ядерное вещество окрашено в фиолетовый цвет. Б) ОКРАСКА НУКЛЕОИДА БАКТЕРИЙ ПО РОМАНОВСКОМУ – ГИМЗА Техника окраски: 1) приготовленный препарат высушивают на воздухе; 2) фиксируют жидкостью Карнуа или смесью Никифорова; 3) фиксированные мазки подсушивают на воздухе и окрашивают рабочим раствором Романовского - Гимзы (к 10 мл дистиллированной воды добавляют 10 капель коммерческого красителя Романовского - Гимзы), погружая стекло в стаканчик с красителем. 4) Через 1 ч краситель сливают, и препарат промывают дистиллированной водой. 5) Готовый препарат высушивают на воздухе и микроскопируют. Оценка результатов. Протоплазма форменных элементов ткани окрашивается в голубовато-синий цвет, ядра клеток - в фиолетово-красный, тела микробных клеток приобретают фиолетово-красный цвет. Приложение 5 А) ВЫЯВЛЕНИЕ ЗЁРЕН ВОЛЮТИНА ПО НЕЙССЕРУ Техника окраски: 1. Готовят мазок, высушивают, фиксируют жаром. 2. Наливают на мазок 1-2 капли уксуснокислого метиленового синего Нейссера, красят 1 - 2 минуты. 3. Краску сливают, наносят раствор Люголя на 1 мин. 4. Промывают водой, подсушивают фильтровальной бумагой. 5. Наносят раствор везувина (хризоидина) для окраски тела бактерии на 1 – 3 мин. 6. Смывают водой, высушивают, микроскопируют. Оценка результатов. В мазке цитоплазма бактерий окрашивается в жёлто-коричневый цвет, зёрна волютина - от сине-зелёного до сине-чёрного цвета.
Б) ВЫЯВЛЕНИЕ ЗЁРЕН ВОЛЮТИНА ПРОСТЫМ МЕТОДОМ ЛЕФФЛЕРА Техника окраски: 1. Исследуемый материал наносят на чистые обезжиренные предметные стекла, растирают его тонким равномерным слоем по поверхности стекла, высушивают на воздухе. 2. Препарат фиксируют 3 мин в 96% этиловом спирте и высушивают. 3. На высушенный препарат наносят каплю 1% щелочного раствора метиленового синего по Леффлеру и окрашивают в течение 3 - 10 минут. 3. Промывают погружением в стакан с водопроводной водой. 4. Высушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсионной системой. Оценка результата . При правильном окрашивании в микроскопируемом препарате видны голубые бактерии на бесцветном или слабо голубом фоне. Приложение 6 |
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-10; Просмотров: 641; Нарушение авторского права страницы